Méthode de la réduction d'acétylène
Chromatographe
à gaz portable
La
fixation d'azote a été estimée en utilisant la méthode de la
réduction acétylène et de la production éthylène (Stewart et al.
1967;
Hardy et al. 1986;
Larkum et al. 1988). Des
mesures ont été faites à court terme (4 h) et à long
terme (12-24 h).
La fixation d'azote dans le noir a été mesurée la nuit et le
jour en emballant les bouteilles d'incubation dans une feuille
d'aluminium et de plastique noir.
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Les échantillons de sédiment
de 2 cm d'épaisseur ont été
placés dans un flacon d'incubation en verre de 500 ml muni d'un
couvercle à ressort Perspex et d'un port à injection en
caoutchouc (Larkum et al.
1988). |
Les
récipients contenaient un volume de 100 ml d'eau de mer et 400 ml
d'air. Les
expériences ont démarré par aspiration de 50 ml d'air et
injection de 50 ml de C2H2.
La plupart des expériences ont eu lieu dans
des flacons incubés en sub-surface de manière à maintenir une
température semblable à celle in situ. Cependant pour
estimer l'influence de la lumière, quelques incubations ont
été faites à différentes profondeurs. A la fin des
incubations et après agitation, 4 ml de
gaz ont été prélevés.
La
concentration en éthylène a été mesurée à l'aide d'un
chromatographe à gaz, portable, pourvu d'une colonne en acier
inoxydable (Poropak T) et d'un capteur de conductivité
sensible à la chaleur. Le
système a été calibré avec des dilutions connues de C2H4
toutes les 10 analyses.
Il
est important d'étalonner pour chacune des communautés
étudiées la méthode de réduction d'acétylène en utilisant
de 15N2.
Cela a été fait en incubant des échantillons de
cyanobactéries benthiques pendant 24h dans une chambre de
culture avec une lumière continue de 50 µE m-2 h-1 en présence de C2H2. A la fin de
l'expérience, l'azote gazeux N2 a
été éliminé des flacons d'incubation en bullant de l'hélium
pendant plusieurs minutes. Puis 50 ml de He ont été aspirés et remplacés par 50 ml de 15N2.
Chacun des deux échantillons dupliqués a ensuite été
ré-incubé pendant 24 h dans les mêmes conditions
qu'auparavant mais avec 20.2 Pa de 98 at% 15N2.
A la fin de l'incubation, un échantillon de gaz a été
prélevé dans des tubes à vide de 4 ml, et les
communautés incubées ont aussitôt été congelées. L'eau et
les organismes incubés ont été digérés selon la méthode de Kjeldahl.
L'ammoniaque a ensuite été distillé à la
vapeur d'acide borique et titré avec une solution
diluée de HCl comme décrit par Bergersen (1980).
La technique de micro-diffusion mise au point par Slawyk
et Raimbault (1995) a été
utilisée pour récupérer l'azote dissous. Les mesures du
pourcentage de 15N
ont été faites sur le spectromètre de masse du COM (Europa
Cientific).
Cette
page est extraite de :
Charpy-Roubaud
C., Charpy L., Larkum A.W. (2001) Atmospheric dinitrogen
fixation by benthic communities of Tikehau Lagoon (Tuamotu
Archipelago, French Polynesia) and its contribution to benthic
primary production. Mar. Biol. 139: 991-997
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